中性和石灰性土壤*磷的測定儀

5.3.3.1方法原理  石灰性土壤由於(yu) 大量遊離碳酸鈣存在，不能用酸溶液來提有效磷。一般用碳酸鹽的堿溶液。由於(yu) 碳酸根的同離子效應，碳酸鹽的堿溶液降低碳酸鈣的溶解度，也就降低了溶液中鈣的濃度，這樣就有利於(yu) 磷酸鈣鹽的提取。同時由於(yu) 碳酸鹽的堿溶液，也降低了鋁和鐵離子的活性，有利於(yu) 磷酸鋁和磷酸鐵的提取。此外，碳酸氫鈉堿溶液中存在著OH-、HCO3-、CO32-等陰離子，有利於(yu) 吸附態磷的置換，因此NaHCO3不僅(jin) 適用於(yu) 石灰性土壤，也適應於(yu) 中性和酸性土壤中*磷的提取。待測液中的磷用鉬銻抗試劑顯色，進行比色測定。

5.3.3.2主要儀(yi) 器  往複振蕩機、分光光度計或比色計。

5.3.3.3試劑

（1）0.05 mol·L-1NaHCO3浸提液  溶解NaH CO342.0g於(yu) 800mL水中，以0.5 mol·L-1NaOH溶液調節浸提液的pH至8.5。此溶液曝於(yu) 空氣中可因失去CO2而使pH增高，可於(yu) 液麵加一層礦物油保存之。此溶液貯存於(yu) 塑料瓶中比在玻璃中容易保存，若貯存超過1個(ge) 月，應檢查pH是否改變。

（2）無磷活性炭。活性炭常含有磷，應做試驗，檢驗有無磷存在。如含磷較多，須先用2mol·L-1HCl浸泡過夜，用蒸餾水衝(chong) 冼多次後，再用0.05 mol·L-1NaHCO3浸泡過夜，在平瓷漏鬥上抽氣過濾，每次用少量蒸餾水淋洗多次，並檢查到無磷為(wei) 止。如含磷較少，則直接用NaHCO3處理即可。

其他鉬銻抗試劑、磷標準溶液同5.2.2.3試劑中（6）、（7）。

5.3.3.4操作步驟  稱取通過20目篩子的風幹土樣2.5g（到0.001g）於(yu) 150mL三角瓶（或大試管）中，加入0.05 mol·L-1NaHCO3溶液50mL，再加一勺無磷活性炭（注1），塞緊瓶塞，在振蕩機上振蕩30min（注2），立即用無磷濾紙過濾，濾液承接於(yu) 100mL三角瓶中，吸取濾液10mL（含磷量高時吸取2.5～5.0mL，同時應補加0.05 mol·L-1NaHCO3溶液至10mL）於(yu) 150mL三角瓶中（注3），再用滴定管準確加入蒸餾水35mL，然後移液管加入鉬銻抗試劑5mL（注4），搖勻，放置30min後，用880nm或700nm波長進行比色。以液的吸收值為(wei) 0，讀出待測液的吸收值（A）。

標準曲線繪製：分別準確吸取5µg·mL-1磷標準溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL於(yu) 150mL三角瓶中，再加入0.05 mol·L-1NaHCO310mL，準確加水使各瓶的總體(ti) 積達到45mL，搖勻；後加入鉬銻抗試劑5mL，混勻顯色。同待測液一樣進行比色，繪製標準曲線。後溶液中磷的濃度分別為(wei) 0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5µg·mL-1P。

5.3.3.5結果計算

土壤中有效磷（P）含量（mg·kg-1）=

式中：：ρ——從(cong) 工作曲線上查得磷的質量濃度（µg·mL-1）； 

       m——風幹土質量（g）；

       V——顯色時溶液定容的體(ti) 積（mL）；

       103——將µg 換算成的mg；

       ts——為(wei) 分取倍數；（即浸提液總體(ti) 積與(yu) 顯色對吸取浸提液體(ti) 積之比）；

       k——將風幹土換算成烘幹土質量的係數；

       1000——換算成每kg含磷量。

表5-3   土壤*磷分級

注釋

注1．活性炭對PO43-有明顯的吸附作用，當溶液中同時存在大量的HCO3-離子飽和了活性炭顆粒表麵，抑製了活性炭對PO43-的吸附作用。

注2．本法浸提溫度對測定結果影響很大。有關(guan) 資料曾用不同方式校正該法浸提溫度對測定結果的影響，但這些方法都是在某些地區和某一條件下所得的結果，對於(yu) 各地區不同土壤和條件下不能*適用，因此必須嚴(yan) 格控製浸提時的溫度條件。一般要在室溫（20～25℃）下進行，具體(ti) 分析時，前後各批樣品應在這個(ge) 範圍內(nei) 選擇一個(ge) 固定溫度以便對各批結果進行相對比較。在恒溫振蕩機上進行提取。顯色溫度（20℃左右）較易控製。

注3．由於(yu) 取0.05 mol·L-1NaHCO3浸提濾液10mL於(yu) 50mL容量瓶中，加水和鉬銻抗試劑後，即產(chan) 生大量的CO2氣體(ti) ，由於(yu) 容量瓶口小，CO2氣體(ti) 不易逸出，在搖勻過程中，常造成試液外溢，造成測定誤差。為(wei) 了克服這個(ge) 缺點，可以準確加入提取液、水和鉬銻抗試劑（共計50mL）於(yu) 三角瓶中，混勻，顯色。

注4．全磷鉬銻抗法，其顯色溶液的酸的濃度為(wei) 0.55mol·L-1 (1/2 H2SO4)，鉬酸銨濃度為(wei) 1g·L-1。 在A.L.Page,Methods of Soil Analysis.part 2，1982（419～422頁）Olsen法中先用H2SO4中和NaHCO3提取液至pH5，再加鉬銻抗試劑使後顯色溶液的酸的濃度為(wei) 0.42mol·L-1 (1/2 H2SO4)，鉬酸銨濃度為(wei) 0.96g·L-1。經試驗，用本法測定磷的含量，其結果是很的。為(wei) 了統一應用全磷測定中的鉬銻抗試劑，同時考慮到Olsen法是屬於(yu) 例行方法，可以省去中和步驟， 這樣後顯色液酸的濃度約為(wei) 0.45mol·L-1 (1/2 H2SO4)，鉬酸銨濃度為(wei) 1.0g·L-1，這樣仍在合適的顯色的酸的濃度範圍。

5.3.4酸性土壤*磷的測定方法A——0.03 mol·L-1NH4F—0.025mol·L-1HCl

5.3.4.1方法原理  NH4F—HCl法主要提取酸溶性磷和吸附磷，包括大部分磷酸鈣和一部分磷酸鋁和磷酸鐵。因為(wei) 在酸性溶液中氟離子能與(yu) 三價(jia) 鋁離子和鐵離子形成絡合物，促使磷酸鋁和磷酸鐵的溶解：

3NH4F +3HF+AlPO4→H3PO4+(NH4)3AlF6

3NH4F +3HF+FePO4→H3PO4+(NH4)3FeF6

溶液中磷與(yu) 鉬酸銨作用生成磷鉬雜多酸，在一定酸度睛被SnCl2還原成磷鉬藍，藍色深淺與(yu) 磷的濃度成正比。

5.3.4.2試劑

（1）0.5mol·L-1鹽酸溶液。20.2mL濃鹽酸用蒸餾水稀釋至500mL。

（2）1mol·L-1氟化銨溶液。溶解NH4F37g於(yu) 水中，稀釋至1L，貯存在塑料瓶中。

（3）浸提液。分別吸取1.0mol·L-1NH4F溶液15mL和0.5mol·L-1鹽酸溶液25mL，加入到460mL蒸餾水中，此即0.03mol·L-1NH4F—0.025mol·L-1HCl溶液。

（4）鉬酸銨試劑。溶解鉬酸銨(NH4)6MoO24·4H2O15g於(yu) 350mL蒸餾水中，徐徐加入10mol·L-1HCl350mL，並攪動，冷卻後，加水稀釋至1L，貯於(yu) 棕色瓶中。

（5）25g·L-1氯化亞(ya) 錫甘油溶液。溶解SnCl2·2H2O 2.5g於(yu) 10mL濃鹽酸中，待SnCl2全部溶解溶液透明後，再加化學純甘油90mL，混勻，貯存於(yu) 棕色瓶中（注1）。

（6）50µg·mL-1磷（P）標準溶液參照土壤全磷測定方法一。吸取50µg·mL-1磷溶液50mL於(yu) 250mL容量瓶中，加水稀釋定容，即得10g·mL-1磷（P）標準溶液。

5.3.4.3操作步驟  稱1.000g土樣，放入20mL度管中，從(cong) 滴定管中加入浸提液7mL。試管加塞後，搖動1min，用無磷幹濾紙過濾。如果濾液不清，可將濾液倒回濾紙上再過濾，吸取濾液2mL（注2），加蒸餾水6mL和鉬酸銨試劑2mL，混勻後，加氯化亞(ya) 錫甘油溶液1滴，再混勻。在5～15min內(nei) （注3），在分光光度計上用700nm波長進行比色（注4）。

標準曲線的繪製：分別準確吸取10g·mL-1磷（P）標準溶液2.5、5.0、10.0、15.0、20.0和25.0mL，放入50mL容量瓶中，加水至刻度，配成0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0µg·mL-1磷（P）係列標準溶液。

分別吸取係列標準溶液各2mL，加水6mL和鉬試劑2mL，再加1滴氯化亞(ya) 錫甘油溶液進行顯色，繪製標準曲線。

表5-4  磷的係列標準溶液（NH4F—HCl法）

*包括2mL提取液。

5.3.4.5結果計算

土壤*磷（P）含量（mg·kg-1）=

式中：ρ——從(cong) 標準曲線上查得磷的質量濃度（µg·mL-1）； 

      m——風幹土質量（g）；

      10——顯色時定容體(ti) 積（mL）；

      7 ——浸提劑的體(ti) 積（mL）； 

      2 —— 吸取濾液的體(ti) 積（mL）；   

103——將µg 換算成的mg；

      1000——換算成每kg含磷量。

表5-5     土壤*磷分級