固相萃取儀的操作方法

固相萃取儀(yi) 是液固萃取柱和液相色譜技術結合發展而來的樣品預處理技術，可用於(yu) 樣品的分離、純化和濃縮，廣泛應用於(yu) 醫藥、食品、環保等領域。
 

　　1.選擇小柱或濾膜
 

　　小柱或濾膜的大小與(yu) 規格應視樣品中待測物的濃度大小而定。對於(yu) 濃度較低的體(ti) 內(nei) 樣品, 一般應選用盡量少的固定相填料萃取較大體(ti) 積的樣品。
 

　　2.活化
 

　　萃取前先用充滿小柱的溶劑衝(chong) 洗小柱或用5-10ml 溶劑衝(chong) 洗濾膜使填料保持濕潤, 因為(wei) 填料幹燥會(hui) 降低樣品保留值，而各小柱的幹燥程度不一,也會(hui) 影響回收率的重現性。
 

　　3.上樣
 

　　一般可采取以下四種方法：
 

　　(1) 用0.1mol/L 酸或堿調節, 使pH<3或pH>9, 離心取上層液萃取；
 

　　(2)用甲醇、乙腈等沉澱蛋白質後取上清液, 以水或緩衝(chong) 液稀釋後萃取；
 

　　(3)用酸或無機鹽沉澱蛋白質後取上清液, 調節pH 值後萃取；
 

　　(4)超聲15min後加入水、緩衝(chong) 液, 取上清液萃取。流速應控製為(wei) 1ml/min, 流速快不利於(yu) 待測物與(yu) 固定相結合。
 

　　4.淋洗
 

　　反相SPE的清洗溶劑多為(wei) 水或緩衝(chong) 液, 可在清洗液中加入少量有機溶劑、無機鹽或調節pH值。加入小柱的清洗液應不超過一個(ge) 小柱的容積, 而SPE濾膜為(wei) 5～10ml。
 

　　5.洗脫
 

　　應選用5～10ml離子強度較弱但能洗下待測物的洗脫溶劑。若需較高靈敏度, 則可先將洗脫液揮幹後, 再用流動相重組殘留物後進樣。體(ti) 內(nei) 樣品洗脫後多含有水, 可選用冷凍幹燥法。保留能力較弱的SPE 填料可用小體(ti) 積、較弱的洗脫液洗下待測物,再用極性較強的HPLC 分析柱分析洗脫物。